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Das Ananassubstrat wurde auf dem Markt in Chidambaram gesammelt. Die Materialien wurden in kleine Stücke geschnitten und der Saft wurde extrahiert. Das Saftsubstrat wurde physikalischen, chemischen und biologischen Vorbehandlungsmethoden unterzogen, um die fermentierbaren Zucker aus den komplexen Polysacchariden freizusetzen und effiziente Vorbehandlungsmethoden auszuwählen. Die Hefe Saccharomyces cerevisiae wurde aus dem extrahierten Ananassaft isoliert. Die Wachstumsrate der Saccharomyces cerevisiae-Kulturen wurde mit verschiedenen Zuckern und Stickstoffquellen getestet. Unter diesen förderte Glukose ein maximales Wachstum von 0,74 % bei einer Konzentration von 15 % nach 48 Stunden Inkubation, und unter den Stickstoffquellen wurde eine maximale Zelldichte von 1,47 nach 48 Stunden Inkubation beobachtet, wenn 1000 mg Ammoniumsulfat hinzugefügt wurden. Die Fermentationsparameter wie pH-Wert, Temperatur und Inokulumgröße wurden für enzymatisch hydrolysierte Traubensaftreste optimiert. Es wurden die pH-Parameter 3,5, 4,5, 5,5 und 6,5 gewählt. Unter diesen waren 5,5 ideal für die Hefegärung. Der mit den optimierten Parametern erzielte Ethanolertrag betrug 22,17 g L-1. Eine Temperatur von 44 ºC und eine Inokulumgröße von 1 % waren ideal für die Hefegärung.