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Nos últimos anos, o sequenciamento de DNA de próxima geração emergiu como uma tecnologia nova e poderosa, permitindo uma visão muito mais abrangente dos sistemas biológicos no nível genético e, portanto, mais descobertas médicas. Não muito tempo atrás, o método Sanger para sequenciamento de DNA, considerado como sequenciamento de DNA de primeira geração, foi o burro de carga na conclusão do projeto do genoma humano. O método Sanger foi muitas vezes a melhor escolha para sequenciamento de novo, ressequenciamento, genotipagem e análise de fragmentos. No entanto, o alto custo e a baixa velocidade do método de Sanger apresentaram um obstáculo para sequenciar um grande número de bases conforme necessário na era da medicina personalizada. Para lidar com essas desvantagens, muitas empresas e pesquisadores desenvolveram com sucesso métodos de "sequenciamento de DNA de próxima geração", ou seja, qualquer novo método de sequenciamento com menor custo e maior velocidade que não seja baseado no método de Sanger. Este capítulo apresentará primeiro a tecnologia de sequenciamento de DNA de próxima geração e, em seguida, fará uma sinopse de sua aplicação em descobertas médicas. O objetivo deste capítulo é fazer com que os leitores se familiarizem com a tecnologia de sequenciamento de DNA de última geração.